Quick Cell

Quick Cell品牌说明

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品牌：Quick Cell     Quick Cell官网：http://www.life-ilab.com/

Quick Cell代理商：四五零实验试剂     在线Quick Cell产品查找：http://a.450bio.com

产品名称:Quick Cell 支原体快速检测试剂盒(细胞培养专用)

货号:C4056L1060

规格:48 T

保存: -20℃

价格: 1250

产品简介:

Quick Cell支原体快速检测试剂盒，不用仪器，不需样品处理，1小时观测结果，消除假阴性，超高灵敏度，准确率99.9%以上。

产品说明

Quick Cell支原体快速检测试剂盒，不用仪器，不需样品处理，1小时观测结果，消除假阴性，超高灵敏度，准确率99.9%       

《Quick Cell快速支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养上清或别的液体样品（如血清）中是否含有支原体污染，该试剂盒仅用于基础科研。

 

哺乳动物细胞的培养，支原体（Mycoplasma）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。本试剂盒可以检测：（1）M.Hyorhinis、（2）M.Fermentans、（3）M.Arginini、（4）M. hominis、（5）M. orale、（6）M. salivarium、（7）M.pirum、（8）Acholeplasma Laidlawii、（9）M. agalactiae、（10）M.bovis、（11）M. buccale、（12）M. arthritidis、（13）M. pulmonis等几乎所有常见的污染细胞的支原体（注：M.为Mycoplasma的缩写）。以上13种支原体约占细胞支原体污染的99%以上，本试剂盒产品全部可以检测。绝大多数支原体污染集中于前8种。注意：本试剂盒无法检测Ureaplasma Urealyticum支原体！Ureaplasma Urealyticum在支原体污染种极其罕见。

 

与PCR法比较产品优点:

1.Quick Cell支原体检测法不需样品处理，没有假阴性。常规PCR法需要样品处理，而且细胞培养液中的扩增抑制物可能会造成假阴性。

2.因为反应原理不一样，Quick Cell法检测灵敏度较PCR法高80-100倍。

3.快速简单，不需仪器，一步反应，1小时目测结果。

与PCR法检测支原体比较，本试剂盒产品优势优势显著：

比较内容	支原体检测PCR法	Quick Cell 快速支原体检测试剂盒
操作时间	3小时	1小时
是否需要样品处理	样品需预处理，DNA提取	无需样品处理，直接使用上清
灵敏度	灵敏度低	较PCR法提高1000倍
是否需要电泳	需要电泳及染色	不需电泳，目测结果

试剂盒组成

（1）溶液Ⅰ：1150 μL (50次检测)

（2）溶液Ⅱ：56 μL(50次检测)

（3）溶液Ⅲ：指示剂，25 μL(50次检测)

（4）阳性支原体DNA：50 μL

（5）矿物油：1500 μL

注：1)本试剂盒所指50次测试包含阴性对照、阳性对照，并非50个样品，因每次测试均需设置对照，测试样品数根据实验安排确定，理论上一次最多可测试48个样品。2)使用前用离心机轻微离心，以免管壁上粘附损失试剂减少检测次数。

使用方法

1. 待测样品的准备：为了准确判断细胞是否有支原体的污染，待测的细胞培养液样品zui好来源于至少培养三天且汇合度在70-90%左右的细胞培养上清(贴壁细胞)，无需离心。悬浮培养的细胞也需要在换液传代后，至少让细胞生长3天再取培养液进行检测，也无需离心，哺乳动物细胞的存在不会影响检测结果。

注：收集的待测细胞培养液样品如果不立即检测，请放于-20℃或-80℃冰箱保存，不得放于室温或4℃冰箱。样品在-20℃至少可以保存一个月，在-80℃可以长期保存。此外，为了节约检测成本，可以将不同时间收集的样品放于-20℃或-80℃冰箱保存，而后一起检测。

 

2. 反应体系的配制

表1：恒温反应体系的配制

组   份	理论单个样品用量	样品总数	总体积
溶液Ⅰ	23 μL	N	23×N×1.08 μL
溶液Ⅱ	1 μL	N	1×N×1.08 μL
溶液Ⅲ	0.18 μL	N	0.18×N×1.08 μL

 

(1)    将溶液Ⅰ、溶液Ⅲ从-20℃冰箱中取出，室温放置待其融化，溶液Ⅱ从-20℃冰箱中取出后置于冰上备用。溶液Ⅱ、Ⅲ使用前各需1000rpm离心30秒，用移液枪吹洗均匀。三种试剂按表1比例混合。

注：1）如有多个样品，可先将反应体系配置好，建议溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ用量乘以系数1.08，保证每个反应管中的反应液足量，避免移液时损失。举例：如果待测样品为3个(加上1个阴性和1个阳性对照)，则样品总数为5个。溶液Ⅰ的总体积应该为23×5×1.08=124.2μL，溶液Ⅱ的总体积为1×5×1.08=5.4μL，溶液Ⅲ的总体积为0.18×5×1.08=0.972 μL将溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ混合均匀。如一次用完一个试剂盒，可直接往溶液Ⅰ中加入50μL溶液Ⅱ、7.5μL溶液Ⅲ混匀备用。

2）溶液Ⅱ必须一直在-20 ℃冰箱中保存，并在操作时置于冰上。溶液Ⅱ即使在-20 ℃条件下仍为液态，不需置于室温。

(2)将上述配制好的反应体系，吹打均匀后，按每管24 μL分装到0.2 mL的PCR管中。尽量保证每管的反应液体积一样。 PCR管应该使用透明度良好的薄壁PCR管。

(3)往测试管(Test)中加入1μL待测细胞培养液；往阳性对照管(Positive)中加入1 μL阳性支原体DNA；往阴性对照管(Negative)中加入1μL灭菌水；反应液的总体积为25 μL。

注1：装有阳性支原体DNA的螺口管开盖之前，用力甩一下，或者用迷你离心机即可。

注2：进行反应体系配制的房间，与进行样品前处理、加阳性对照DNA、样品DNA的房间zui好分开。 

3. 反应

PCR仪设置程序：61℃，60 min；10℃, forever；热盖温度，100 ℃。

注意：若实验室反应场所没有PCR仪，可用水浴锅代替，水浴锅显示温度与实际温度的温差不超过0.5℃，另须往每个反应管内加入25μL矿物油，以防止水份挥发，然后盖上盖子，将反应管插入带孔的漂板内，放入已经升温到61℃的水浴内，准确反应60分钟。 

4. 结果判断

61℃反应60分钟后，立刻取出反应管，放于室温。以一张白纸或白色泡沫盒为背景，通过反应管溶液颜色的变化，即可判断检测结果。如果溶液为蓝绿色，则说明有支原体污染；如果为紫红色，则说明没有支原体污染(如图1)。

注：在61℃反应的时间必须准确计时，最多不得超过5分钟，以免出现假阳性。必须在反应后2小时内进行结果判断，避免室温下扩增反应进行，影响结果判别。 

注意事项

1．必须确保使用的移液枪本身没有残留的支原体，尽量用新购移液器、新开封的枪头操作；整个操作过程，佩戴口罩，不要开口说话。由于本试剂盒非常灵敏，移液枪如吸附有，或者人为带入支原体均有可能造成假阳性。

2．zui好使用带滤芯的吸头吸取溶液和阳性支原体等。如果没有带滤芯的吸头，至少应该使用新开封的吸头。

3．检测过程中，用过的各类吸头、离心管务必小心处理，应装入含有半瓶水的带盖的、可密封的垃圾瓶内。反应后的PCR管，不要开盖，用过后将其用自封袋密闭，扔到远离细胞房的独立垃圾桶内。

4．如果细胞被支原体污染，可以选购本公司或其他供应商提供的去除试剂今早去除。 

Q：如实验室无PCR仪怎么办？

A：该试剂只需保持在61℃进行反应，如实验室无PCR仪，也可将反应置于水浴锅中恒温（尽量保证温度起伏不超过0.5℃）保持即可

Q：快速支原体检测的原理是？

A：快速法基于支原体DNA检测，所选序列保守，反应体系经过优化，设有阴性对照，阳性对照，对反应中可能影响结果的因素，第yi时间可以发现

 

产品链接：

http://www.life-ilab.com/a/chanpinzhongxin/xibaoshengwuxue/xibaopeiyang/2016/0121/32.html

公司简介

四五零实验试剂隶属于无锡四五零科技有限公司，是一家资深的实验试剂批发及零售企业,专业销售分子生物学试剂,免疫学试剂,细胞生物学试剂, 蛋白质研究试剂,生物化学试剂,生物学耗材,实验室仪器,有机化合物,ELISA。代理销售国外知名试剂品牌： Corning/Costar/康宁,Agilent/Stratagene/安捷伦,Bender/ebioscience品牌,NEB,SBI。无锡四五零科技有限公司，致力于“让科技创造价值”，我们是一家企业服务和完整解决方案供应商。涵盖行业包括机械设备及配件、生物科技、信息技术、企业管理咨询四大部分。

公司产品

四五零实验试剂产品涵盖8类：1.分子生物学试剂：DNA限制性内切酶、DNA聚合酶、PCR/QPCR试剂、DNA/RNA修饰酶、DNA/RNA分子量标准品、克隆与表达试剂、菌种/感受态细胞及培养基、核酸抽提试剂盒、文库构建、RNA研究试剂、病毒表达、表观遗传学研究试剂、exosome研究试剂、慢病毒试剂、其它分子生物学试剂；2.免疫学试剂：ELISA试剂盒、一抗、二抗、流式抗体、抗原、辅助类产品、其它免疫学试剂；3.细胞生物学试剂：血清、细胞因子与生长因子、培养基、干细胞研究、细胞分析、氧化应激与细胞损伤、细胞信号转导、其它细胞生物学试剂；4.蛋白质研究试剂：蛋白质表达系统、蛋白质纯化、蛋白修饰酶、糖生物学及蛋白质工具、蛋白质、蛋白质分子量标准品、其它蛋白质研究试剂；5.生物化学试剂：生化检测试剂盒；6.生物学耗材：液体处理、细胞培养、多孔板、储存耗材、其它耗材、 硝酸纤维素膜 NC膜、印迹纸；7.实验室仪器：分子生物学仪器、细胞生物学仪器、病理学仪器、其他仪器；8.有机化合物：NAD+、NADH、亚磷酸乙醇、甲苯胺蓝。

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四五零实验试剂最_大的优势是强大而且专业的采购： 1：基本什么都能进口，血清，抗体，耗材，还有部分限制进口的； 2：货品全，现经营过1000多个品牌，基本所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷偏的产品那就更有优势； 3：提供加急服务，一般1-2周到货，超过时限加急费全免； 4：价格公道，绝大部分价格有优势，当然不能保证100_%产品都是价格最_低,因为价格最_低意味着没有服务； 5：良好的信誉，大部分客户我们提供货到付款服务，客户包括清华，北大 交大 复旦，中山等100多所大学，ROCHE，阿斯利康，国药 ，fisher等500多家公司； 6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Sorachim ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Sorachim , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。 7：我们还向invitrogen,qiagen,Sorachim am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发，欢迎合作。

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